來源：本站 作者：by.吉源生物 時(shí)間：2018/12/19

染色體倍性分析服務(wù)

      倍性育種，指通過改變?nèi)旧w的數(shù)量，產(chǎn)生不同的變異個(gè)體，進(jìn)而選擇優(yōu)良變異個(gè)體培育新品種。正常的配子細(xì)胞中所包含的染色體數(shù)或半數(shù)的體細(xì)胞染色體數(shù)稱為一套單倍染色體，用符號(hào)n 表示。具有一個(gè)染色體組的細(xì)胞和由這樣的細(xì)胞組成的個(gè)體稱為單倍體(n) ，具有兩個(gè)染色體組的細(xì)胞或個(gè)體稱為二倍體（2n），具有兩個(gè)以上整套染色體組的細(xì)胞或個(gè)體則稱為多倍體，包括三倍體（3n）、四倍體（4n）等。

      傳統(tǒng)的倍性鑒定主要采用常規(guī)壓片法統(tǒng)計(jì)染色體數(shù)目，但采用這種方法很難尋找到分裂中期染色體分散良好并可進(jìn)行計(jì)數(shù)的細(xì)胞，而且整個(gè)過程耗時(shí)長(zhǎng)，檢測(cè)效率低。采用流式細(xì)胞術(shù)（Flow Cytometry，F(xiàn)CM）進(jìn)行倍性分析的方法簡(jiǎn)化了倍性分析的過程，可以快速準(zhǔn)確檢測(cè)同一物種范圍內(nèi)不同倍性的樣品。FCM作為一項(xiàng)快速、高效的檢測(cè)技術(shù)，被廣泛應(yīng)用于細(xì)胞分類學(xué)、植物遺傳學(xué)及植物生理學(xué)等研究領(lǐng)域中。FCM常被用于鑒定植物倍性水平，通過檢測(cè)植株G0/G1峰的細(xì)胞核DNA含量可以判斷出植物的倍性。

      首先需要裂解液將組織中細(xì)胞核釋放出來，并打開DNA鏈，然后用DAPI染液將細(xì)胞核DNA上的A-T堿基對(duì)特異性染色，再用儀器檢測(cè)出被染色的A-T堿基對(duì)發(fā)出的熒光強(qiáng)度。比如二倍體的熒光強(qiáng)度是100（橫坐標(biāo)），那么單倍體的熒光強(qiáng)度就是50（橫坐標(biāo)）?？v坐標(biāo)是細(xì)胞數(shù)量的顯示，通常來說，信號(hào)峰高說明信號(hào)比較好，雜質(zhì)少。

倍性=待測(cè)樣本的峰值/參照物的峰值*參照物倍性
e.g. 100/50 x 2n = 4n

實(shí)驗(yàn)儀器設(shè)備及方法

      吉源生物采用配置紫外激光的Sysmex-Partec CyFlow 倍性分析儀，搭配Sysmex CyStain DAPI倍性分析試劑盒，在2min內(nèi)即可完成一個(gè)樣本的檢測(cè)，為您提供高效、準(zhǔn)確的檢測(cè)結(jié)果，形成可靠數(shù)據(jù)，出具專業(yè)報(bào)告。實(shí)驗(yàn)步驟如下：

 

      使用Sysmex-Partec原廠倍性分析試劑和CellTrics過濾器，僅需要：

      1.裂解

      2.染色

      3.上機(jī)

      三步，2分鐘內(nèi)完成倍性分析實(shí)驗(yàn)。

                                                               

      Sysmex-Partec  CyFlow Ploidy Analyser            05-5002 CyStain UV Precise               3.5mL流式管以及多種規(guī)格CellTrics濾嘴

部分實(shí)驗(yàn)結(jié)果展示

擬南芥倍性檢測(cè)

凹頭莧種子倍性檢測(cè)

黃精倍性檢測(cè)

羅非魚倍性檢測(cè)

白菜型油菜倍性檢測(cè)

樣品準(zhǔn)備

植物樣品準(zhǔn)備：葉片的新鮮程度直接影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。由于次生代謝產(chǎn)物的影響，會(huì)導(dǎo)致信號(hào)峰過寬，甚至檢測(cè)不到信號(hào)峰的情況。嫩葉的選擇要選取新鮮、完全舒展開、無蟲咬、無枯萎、分裂不活躍的部位實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

魚類樣品準(zhǔn)備：大魚可以取血液樣本檢測(cè)，或者取魚組織檢測(cè)，切取0.5cm²大小的新鮮魚肉即可。

貝類樣品準(zhǔn)備：貝類大樣本可以直接撬開貝殼，取貝的新鮮組織作為樣本。貝類幼苗需要收集剛孵化2-3天內(nèi)的浮游狀態(tài)的幼苗。

如有實(shí)驗(yàn)服務(wù)需求，請(qǐng)聯(lián)系我司，我們將為您提供準(zhǔn)確、可靠的實(shí)驗(yàn)解決方案！

聯(lián)系人：郭經(jīng)理 13380084392  guoyong@geneunion.com

             姜經(jīng)理 15602309098 jiangyan@geneunion.com